平板菌落計數(shù)法的操作步驟
（1）供試品取樣 以無菌操作，按規(guī)定稱取供試品在定量的稀釋劑的適宜容器中。
（2）供試液的制備 固體及半固體供試品∶一般稱取10g，置于勻漿杯或適當滅菌容器中，加入100 ml稀釋劑，用勻漿儀（3000~5000rpm2~4 min），振蕩器或乳缽研磨等方法分散，混勻使成1∶10的均勻供試液。
液體供試品∶一般取10 ml，置滅菌錐形瓶中，加入90ml稀釋劑，搖勻，即為1∶10供試液。
（3）供試液的稀釋（10 倍遞增稀釋法） 取2~3支滅菌試管，分別加入9ml滅菌稀釋劑。另取1支1ml滅菌吸管吸取1∶10均勻供試液1ml，加入裝有9ml滅菌稀釋劑的試管中，混勻即1∶100供試液。以此類推，根據(jù)供試品污染程度，可稀釋至1∶103、或1∶104，一般取1∶10，1∶102，1∶103三級稀釋液檢驗
（4）注平皿 在進行10倍遞增稀釋的同時，以該稀釋級吸管吸取每級稀釋液各1ml置每個滅菌平皿中，每稀釋級注2~3個平皿。另取1支1ml吸管吸取稀釋劑各1ml 注入2個平皿中，作為陰性對照。
（5）傾注培養(yǎng)基 將預先配制好的培養(yǎng)基（營養(yǎng)瓊脂）溶化，冷至約 45℃時，傾注上述各個平皿約15 ml，以順時針或反時針方向快速轉(zhuǎn)動平皿（勿使培養(yǎng)基溢出）使供試液與培養(yǎng)基混勻，放置，待凝。
（6）培養(yǎng) 將已凝固的平板倒置于30~35℃培養(yǎng)箱中，一般培養(yǎng) 48±2h。
（7）菌落計數(shù) 將平板置菌落計數(shù)器上或從平板的背面直接以肉眼用標記筆點計，以透視光襯以暗色背景，仔細觀察，計數(shù)。必要時借助于放大鏡、菌落計數(shù)器和顯微鏡觀察。
細菌菌落形態(tài)特征∶常為白色、灰白色或灰色，亦有淡褐色、淡黃色（如培養(yǎng)基中加入0.1%TTC試劑，菌落為紅色）。
菌落邊緣整齊或不整齊，有放射狀、樹枝狀、鋸齒狀、卷發(fā)狀。菌落表面有光滑、粗糙、皺折、突起或扁平。
菌落大小差別很大，同一平板上可出現(xiàn)針尖大小至大于10 mm菌落。外觀多樣，小而突起或大而扁平，或云霧狀，不規(guī)則。